Preuves empiriques que le sang présent sur le Suaire de Turin est d’origine humaine : les données actuelles sont-elles suffisantes ?

Kelly P. Kearse

Kearse, K. P. (2012). Preuves empiriques que le sang présent sur le Suaire de Turin est d’origine humaine : les données actuelles sont-elles suffisantes ? [Empirical evidence that the blood on the Shroud of Turin is of human origin: Is the current data sufficient?]. https://www.shroud.com/pdfs/kearse1.pdf

Résumé
Des études antérieures ont établi que les zones sanglantes du Suaire de Turin consistent en véritable sang et ne sont pas composées de pigments artistiques. Il est communément rapporté que le sang est d’origine humaine, mais dans quelle mesure les preuves sont-elles suffisantes pour étayer cette conclusion ? Ici, les preuves empiriques de l’origine humaine des traces de sang du Suaire de Turin sont évaluées. Comme discuté, la majorité des données sérologiques soutient l’idée que le sang est bien celui d’un primate, mais une conclusion ferme selon laquelle le sang est indubitablement humain est quelque peu compliquée par la réactivité croisée de nombreux réactifs « spécifiques à l’humain » avec le sang d’autres espèces. Les possibilités de techniques de test additionnelles, dont beaucoup ont été développées depuis que les études originales furent menées il y a environ trente ans, sont également abordées.

Le sang et ses composantsLe corps humain contient environ cinq litres de sang, qui est continuellement pompé dans tout le système circulatoire durant la vie. Le sang se compose de deux parties de base : la portion liquide (le sérum) et la portion cellulaire. De nombreuses variétés de protéines existent dans la fraction sérique, la plus répandue étant l’albumine, importante pour le maintien de la concentration protéique (osmolalité) du sang, et l’immunoglobuline, ou anticorps, qui est un produit du système immunitaire (Figure 1). Ensemble, l’albumine et l’immunoglobuline représentent environ 80 % de toutes les protéines présentes dans le sérum sanguin (1,2).

Figure 1. Le sang total se compose de fractions sériques et cellulaires. La portion sérique contient albumine, immunoglobuline et autres protéines. La portion cellulaire se compose de globules rouges, globules blancs et plaquettes. Voir texte pour détails.

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La portion cellulaire du sang est constituée de trois principaux types de cellules sanguines : les globules rouges (érythrocytes), qui contiennent l’hémoglobine, importante pour le transport de l’oxygène dans l’organisme ; les globules blancs, qui fonctionnent dans la défense contre les organismes étrangers et les maladies, c’est-à-dire le système immunitaire ; et les plaquettes, importantes pour la coagulation (Figure 1). Techniquement, les plaquettes ne sont pas de véritables cellules, mais plutôt des fragments cellulaires générés à partir de cellules plus grandes dans la moelle osseuse (connues sous le nom de mégacaryocytes) (1,2).

Les globules rouges constituent environ 40 % du volume sanguin ; dans une portion microfluide typique de sang, les globules rouges surpassent les globules blancs dans un rapport d’environ 500 pour 1. En moyenne, le corps humain contient environ 20 à 30 trillions de globules rouges, ayant une durée de vie (renouvellement) comprise entre 100 et 120 jours (1,2). Les plaquettes sont beaucoup plus nombreuses que les globules blancs, mais en raison de leur petite taille relative, elles ne représentent qu’une faible fraction du volume sanguin.

Tests de détection de la présence de sang

Les tests chimiques les plus courants utilisés pour déterminer si un échantillon contient réellement du sang impliquent une réaction avec la structure en anneau de l’hémoglobine, qui contient du fer lié. Un test positif pour l’hémoglobine est indiqué par un changement de couleur unique, facilement visible à l’œil nu (2). De plus, une technique plus détaillée appelée spectroscopie peut être utilisée, dans laquelle un appareil de diagnostic mesure l’échantillon à des longueurs d’onde spécifiques de lumière et génère un graphique correspondant. En comparant les profils graphiques de substances connues, on peut déterminer la composition de l’échantillon. L’hémoglobine représente un pic majeur dans de tels schémas (appelé la bande de Soret) et constitue l’un des pics de référence utilisés pour confirmer que l’échantillon est bien du sang. D’autres tests peuvent également être effectués pour détecter d’autres composants sanguins caractéristiques tels que la fibrine, le fibrinogène, les produits de dégradation de l’hème (y compris la bilirubine) et les oligo-éléments.

De multiples études chimiques ont clairement démontré que des composants sanguins sont présents dans les zones sanglantes du Suaire (3-6). Cependant, de telles analyses ne peuvent être utilisées que pour vérifier que du sang est bien présent ; ces types de tests ne permettent pas de distinguer à quelle espèce le sang peut appartenir. Pour cela, des expérimentations supplémentaires utilisant d’autres techniques doivent être effectuées, comme décrit ci-dessous.

Distinguer le sang humain du sang animal

Dans des taches de sang récentes, le sang humain peut être distingué de celui de quelques types animaux par un simple examen microscopique. Contrairement aux globules rouges des mammifères, qui perdent leur noyau lors de la maturation, les globules rouges des oiseaux, des amphibiens et des poissons conservent un noyau tout au long de leur durée de vie, ce qui est facilement observable à faible grossissement (7). Si suffisamment de globules blancs sont présents dans l’échantillon, une technique connue sous le nom de caryotypage peut être effectuée (à un grossissement nettement plus élevé), laquelle examine le nombre et le type de paires spécifiques de chromosomes existant dans le noyau (2). Parmi les primates, seuls les humains possèdent 23 paires de chromosomes (22 paires de chromosomes non sexuels et 1 paire (XX ou XY) de chromosomes sexuels), pour un total de 46. Les chimpanzés, gorilles et orangs-outans possèdent une paire supplémentaire de chromosomes non sexuels (23 paires plus 1 paire de XX ou XY), pour un total de 48.

Le nombre de chromosomes chez d’autres espèces est assez variable ; par exemple, les porcs en ont 38, les moutons 54, les chiens 78 et les vaches 60 (8).

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Dans des taches de sang anciennes, de tels tests microscopiques ne sont pas pratiques car les cellules deviennent déshydratées et se rompent en quelques heures après le séchage. Ainsi, distinguer le sang humain du sang animal dans des échantillons secs repose sur la détection de produits sanguins spécifiques, par une méthode connue sous le nom d’analyse sérologique ou sérologie. Pour ces études, des composants sanguins spécifiques (généralement l’albumine ou les protéines immunoglobulines, voir Figure 1) sont détectés en utilisant des anticorps qui sont créés chez une autre espèce qu’un humain, par exemple le lapin ou la souris (1,2). Ces anticorps sont capables de reconnaître spécifiquement des régions de protéines humaines qui sont distinctes de celles des espèces hôtes dans lesquelles elles sont produites. Le sang de poulet ne réagirait pas dans de tels tests, parce que, même si l’albumine (ou l’immunoglobuline) est présente, la différence avec l’albumine humaine (ou l’immunoglobuline) est suffisante pour que l’anticorps ne la reconnaisse pas. De même, le sang de nombreux autres types communs d’animaux est distingué dans de tels tests, y compris celui de vaches, chevaux, chèvres, moutons, chats, chiens, etc. Assez souvent, une réaction positive dans de tels tests aboutit à la conclusion que du sang humain est présent.

Cependant, c’est ici que les choses deviennent quelque peu ardues. Les espèces étroitement apparentées à l’homme (c’est-à-dire les singes et les grands singes) expriment une albumine (et une immunoglobuline) suffisamment similaire à la protéine humaine pour réagir positivement dans de tels tests (1,2,9). En règle générale, ceci est ignoré sauf si des circonstances particulières justifient que de telles possibilités soient prises en compte (dans une scène de crime à l’intérieur d’un zoo, par exemple, ou si quelqu’un était connu pour avoir des singes ou des grands singes comme animaux de compagnie). Dans la plupart des situations, lorsqu’il est indiqué que des taches de sang ont réagi positivement pour du sang humain, cette présupposition sous-jacente existe. Strictement parlant, de tels tests ne distinguent donc pas le sang humain de celui des autres primates (singes ou grands singes).

Concernant le Suaire, Heller, Adler et leurs collaborateurs ont directement démontré une telle réactivité croisée dans leurs études en montrant que les anticorps « spécifiques à l’humain » utilisés dans leurs expériences réagissaient également avec du sang provenant de primates non humains (3-6). Ainsi, ils n’étaient disposés à conclure de façon définitive que le sang était (au moins) du sang de primate. Dans des études connexes menées par Baima Bollone et ses collaborateurs pour caractériser des fibres tachées de sang du Suaire, la réactivité croisée de leurs réactifs « spécifiques à l’humain » n’a pas été rapportée, mais certainement les mêmes limitations s’appliquent (10-12). De même, Garza-Valdez a rapporté la réactivité de fibres tachées de sang avec des anticorps dirigés contre l’hémoglobine humaine adulte, mais aucun détail concernant la véritable spécificité de ces anticorps n’était disponible (13, et note jointe). Étant donné la forte homologie de séquence entre les protéines d’hémoglobine exprimées chez les primates humains et non humains (14), il est raisonnable de s’attendre à ce que de tels anticorps réagissent de façon croisée avec l’hémoglobine exprimée chez des espèces similaires.

Au début des années 1980, Baima Bollone et ses collègues rapportèrent que les taches de sang du Suaire appartenaient au groupe sanguin AB (11, 12). Les typages sanguins ont été largement examinés ailleurs (15) et ne seront pas discutés en détail ici, si ce n’est pour dire que les antigènes ABO sont partagés entre les humains et certains primates non humains ; ainsi, le typage ABO, en lui-même, ne peut pas spécifiquement distinguer le sang humain du sang d’autres primates, bien qu’il puisse réduire la liste (15).

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Quelques années plus tard, Baima Bollone et al. poursuivirent leurs études sérologiques sur le Suaire en utilisant des anticorps comme sondes moléculaires pour détecter d’autres composants sanguins présents sur les globules rouges, spécifiquement les antigènes M, N et S. Dans un bref rapport, les auteurs montrèrent que les taches de sang pouvaient être caractérisées davantage comme étant MNS positives (16). Ce qui est le plus significatif dans ces études, c’est que contrairement aux antigènes M et N, qui sont partagés entre certains primates et les humains, l’antigène S est exclusif aux humains uniquement. Aucun équivalent de l’antigène S n’existe dans d’autres espèces, y compris chez les singes ou les grands singes (17). Ce point n’était pas souligné (ou mentionné) dans le rapport, car l’importance de cette relation parmi les primates ne fut pleinement élucidée que plusieurs années plus tard (dans des études non liées au Suaire) (17-19).

À l’exception de ce rapport singulier, toutes les preuves immunologiques actuelles sont incapables de distinguer efficacement le sang humain du sang de primates non humains. À ce jour, ce bref rapport demeure la seule pièce définitive de preuve sérologique qui aborde directement l’origine humaine du sang sur le Suaire.

ADN humain sur le Suaire

Dans les discussions sur la nature humaine du sang présent sur le Suaire, il est souvent mentionné que de l’ADN humain a été trouvé dans les taches de sang. Dans les années 1990, Garza-Valdes rapporta dans le livre The DNA of God le clonage de trois segments de gènes humains à partir de résidus sanguins sur le Suaire : le gène de la bêta-globine (qui code une portion de la protéine hémoglobine) et les gènes amélogénine-X et amélogénine-Y (spécifiques pour les protéines codées respectivement sur les chromosomes sexuels X et Y) (13).

Le génome humain est estimé contenir environ 20 000 à 25 000 gènes codant pour des protéines, une estimation bien plus réduite que celle initialement proposée (20), et qui est contenue dans 23 paires de chromosomes. Le clonage, dans le contexte des études de Garza-Valdes, signifie copier une portion, ou un segment, de trois de ces gènes à partir de l’ensemble complet de l’ADN qui existe dans une cellule humaine. Cela est analogue au fait d’ouvrir un très grand livre et de copier plusieurs phrases provenant de trois paragraphes distincts situés sur trois pages différentes dans trois chapitres entièrement différents. De même que reproduire quelques phrases ne commence même pas à recréer le livre entier, de telles expériences ne s’approchent en rien de la création d’un être humain, un point qui est parfois mal compris.

Les résultats des études de Garza-Valdes indiquaient que le sang présent sur le Suaire appartenait à un être humain, et plus précisément à un individu de sexe masculin (13). Une question soulevée dans de telles expériences est celle de la contamination de l’ADN, c’est-à-dire : l’ADN séquencé provenait-il réellement des cellules sanguines présentes sur le tissu ; ou pourrait-il également y avoir une contribution d’un ADN dit « de contact » (touch DNA) : ADN transféré par contact d’autres personnes, directement ou indirectement, par l’intermédiaire d’un objet manipulé qui serait entré en contact avec le tissu. Étant donné que les gènes mentionnés ci-dessus ne sont pas exclusifs aux cellules sanguines, mais se trouvent également dans de nombreux autres types cellulaires, y compris la peau, cette question demeure en partie ouverte (15).

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Le gène de la bêta-globine humaine se compose de trois segments codants (exons) ; la séquence spécifique qui fut examinée dans ces études se situe dans le premier segment codant (exon 1) et compte environ 265 paires de bases de longueur. (Une base est l’un des quatre codes de séquence de l’ADN, ou nucléotides, qui sont habituellement indiqués par les abréviations A, G, C ou T). En comparant à la fois les nucléotides présents et l’ordre spécifique dans lequel ils sont arrangés, on peut identifier avec certitude un gène particulier ; cela est analogue au fait d’évaluer des lettres de l’alphabet et leur arrangement particulier en mots lors de l’étude d’un document écrit.

Pour le segment de gène qui fut évalué, il existe une très forte homologie parmi les gènes de la bêta-globine exprimés chez la plupart des primates. Les humains diffèrent des espèces étroitement apparentées (chimpanzé et gorille) uniquement par un seul nucléotide au sein de la région entière de 265 paires de bases (Figure 2) ; le reste du gène est identique dans les trois espèces (21). D’autres primates tels que l’orang-outan et le macaque diffèrent des humains respectivement par 5 et 6 nucléotides dans ce segment (21), (Figure 2).

Figure 2. Gène de la sous-unité bêta de l’hémoglobine (bêta-globine).
Une portion de la séquence du gène de la bêta-globine est montrée. La différence nucléotidique unique entre l’homme et d’autres primates apparentés est mise en évidence. Hs (Homo sapiens = humain), Pt (Pan troglodytes = chimpanzé), Gg (Gorilla gorilla = gorille), et Pa (Pongo abelii = orang-outan). La séquence de l’orang-outan est identique à celle de l’homme dans cette région, mais contient 5 différences nucléotidiques dans d’autres régions du gène (non montrées). Les alignements de gènes ont été réalisés à l’aide du programme d’alignement du navigateur génomique Ensembl (http://useast.ensembl.org/index.html).

Bien qu’une seule différence de nucléotide puisse suffire pour distinguer l’ADN humain de celui de primates apparentés, cela relèverait certainement de la marge d’erreur acceptée du séquençage, qui peut survenir lors de la copie et de l’amplification cyclique des gènes dans de telles expériences ; il n’est pas connu combien de répétitions analytiques furent effectuées (13).

Les résultats seraient plus décisifs si des segments supplémentaires du gène de la bêta-globine, contenant davantage de différences nucléotidiques, avaient également été clonés. (Aucune donnée de séquence nucléotidique pour les gènes amélogénine X ou amélogénine Y ne fut publiée dans ces études) (13). Ainsi, de manière similaire aux études sérologiques, la forte homologie entre l’ADN de la bêta-globine humaine et celui de certains primates apparentés peut limiter une conclusion plus définitive tirée de ces expériences.

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Concernant ces résultats, le Dr Garza-Valdes déclara lui-même :

« Mais à ce stade, tout ce que nous pouvions dire du sang était qu’il était ancien, en raison du degré de dégradation de la faible quantité de sang trouvée dans notre échantillon, et qu’il provenait d’un être humain ou d’un grand primate » (13).

Le primate suffit-il ?

Un examen attentif des données actuelles soulève plusieurs questions importantes. Les données existantes sont-elles suffisantes pour affirmer, au-delà de tout doute raisonnable, que le sang est d’origine humaine ? Le caractère peu vraisemblable qu’un faussaire ait pu se procurer du sang de primate non humain pour l’utiliser dans la création du Suaire réduit-il la nécessité d’études complémentaires ? Plus important encore, cette discipline de recherche a-t-elle progressé de manière significative au cours des trente dernières années, au point que des méthodologies plus récentes soient désormais disponibles, permettant de confirmer et d’étendre les résultats antérieurs sur la caractérisation des taches de sang du Suaire ?

Bien que l’on puisse débattre de la probabilité que du sang de singe ou de grand singe ait été facilement disponible pour un artiste désireux de réaliser une contrefaçon réaliste, une telle discussion reste purement anecdotique. De plus, un faussaire déterminé aurait tout aussi bien pu utiliser du sang humain comme médium. La question centrale ici est celle des preuves empiriques concernant la caractérisation du sang présent sur le tissu. Adler a commenté de manière rationnelle les difficultés auxquelles un faussaire se heurterait en essayant d’appliquer du sang (coagulé) sur diverses zones du Suaire (6).

L’objectif de cet article n’est pas de suggérer que du sang de primate non humain aurait été appliqué sur le tissu, mais plutôt d’examiner objectivement la solidité des données actuelles pour démontrer directement que le sang est bien d’origine humaine.

Pour inverser le raisonnement : si un échantillon de sang de primate non humain avait été analysé en parallèle dans toutes les expériences précédentes, l’échantillon aurait-il pu être aisément distingué par de telles analyses ? Comme le montre le tableau 1, alors que la plupart des tests soutiennent la conclusion que le sang est (au minimum) d’origine primate, il n’existe qu’une seule étude sérologique (brève) qui étend cette conclusion à une origine humaine. (Baima Bollone)

(Que les études de séquençage ADN soient incluses ou non comme preuves supplémentaires pour cette conclusion est en partie subjectif et laissé à l’appréciation du lecteur ; voir (15) pour la discussion).

Tests sanguins supplémentaires (futurs)

Comme beaucoup des premières études de caractérisation du sang sur le Suaire furent réalisées il y a environ trente ans, des progrès significatifs ont été accomplis dans certaines techniques désormais disponibles pour une investigation plus approfondie. L’une des avancées les plus importantes dans le domaine de la sérologie est le développement des anticorps monoclonaux, qui commençaient tout juste à être utilisés au début des années 1980. Contrairement aux antisérums polyclonaux précédents, qui contenaient un mélange de différents anticorps généralement réactifs avec de multiples sites sur une protéine, les anticorps monoclonaux reconnaissent un site unique et spécifique, ce qui accroît considérablement leur spécificité et leur sensibilité.

Fait important, la production et la sélection de monoclonaux qui sont spécifiques d’une espèce (sans réactivité croisée) est beaucoup plus efficace qu’avec les antisérums polyclonaux (15). Ainsi, non seulement il existe aujourd’hui davantage d’anticorps dirigés contre d’autres protéines sanguines, mais aussi des anticorps véritablement spécifiques aux composants sanguins humains, qui ne réagissent pas de façon croisée avec ceux de primates étroitement apparentés, sont désormais disponibles.

Tableau 1. Résumé des études de tests sanguins sur le Suaire

Type de test	Composant sanguin (sérum)	Origine
Sérologique	Albumine¹,²	Primate
Sérologique	Immunoglobuline¹,²	Primate
Sérologique	Hémoglobine³	Primate
Type de test	Composant sanguin (cellules)	Origine
Sérologique	Antigènes ABO²,³	(Primate)
Sérologique	Antigènes MN²	Primate
Sérologique	Antigènes S²	Humain
Séquençage ADN	Bêta-globine³	Humain ?

Tableau 1. Résumé des études de tests sanguins liées à l’origine du sang sur le Suaire de Turin.
¹ Études de Heller et Adler, voir Références 3-6 ; ² Études de Baima Bollone et al., voir Références 10-12 ; ³ Études de Garza-Valdes, voir Référence 13.

Pour le typage ABO, les résultats sont inclus entre parenthèses car certains groupes sanguins ABO peuvent distinguer entre humains et certains primates non humains. Les résultats du séquençage ADN sont indiqués par un point d’interrogation en raison de questions non résolues concernant les séquences cibles spécifiques à l’humain et une possible contamination par de l’ADN exogène. Voir le texte pour les détails.

Considérations générales

Dans toute analyse future qui pourrait avoir lieu, il est important de considérer la valeur globale de tels tests dans la confirmation et l’extension des études précédentes visant à caractériser les taches de sang du Suaire. Comme les types de tests décrits ci-dessous sont principalement de nature destructive, et que la quantité d’échantillons disponibles pour l’étude peut être particulièrement limitée, une évaluation détaillée de leur utilité est particulièrement justifiée. Comme cela a déjà été noté, il serait le plus informatif d’évaluer des échantillons parallèles prélevés sur plusieurs zones afin de comparer les résultats (22). La sensibilité accrue des technologies modernes par rapport à celles disponibles par le passé pourrait permettre des expérimentations sur des quantités de matière beaucoup plus réduites.

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De plus, l’examen de l’utilisation de méthodes supplémentaires, en particulier celles employant une approche séquentielle, permettrait d’obtenir plusieurs ensembles d’informations à partir d’un seul échantillon, en conservant ainsi de façon significative la quantité de matière pouvant être requise. De nombreuses études sérologiques antérieures reposaient sur l’évaluation microscopique de la liaison d’anticorps marqués à des échantillons, ce qui est relativement limité en termes de quantification et, dans une certaine mesure, de sensibilité.

Le dosage immuno-enzymatique (ELISA) utilise un principe similaire dans la détection des anticorps, mais nécessite beaucoup moins de matériel et le degré de liaison des anticorps n’est pas aussi subjectif, car il est calculé mécaniquement. En outre, un avantage majeur de cette technique est qu’elle peut être utilisée de manière séquentielle pour évaluer plusieurs composants à partir d’un seul échantillon. Par exemple, si l’on souhaitait analyser cinq composants sanguins différents (A, B, C, D et E), une approche conventionnelle exigerait au moins cinq échantillons distincts (Figure 3).

Dans une approche séquentielle, un échantillon n’est pas utilisé une seule fois puis jeté ; au contraire, le composant A est d’abord analysé, puis le matériel restant est analysé pour B, suivi de C, etc. (Figure 3).

Approche conventionnelle nécessite :

Figure 3. Analyse séquentielle des composants sanguins hypothétiques A–E.
Dans l’approche conventionnelle, un échantillon distinct est requis pour l’analyse de chaque composant, et les échantillons sont jetés après utilisation. Dans l’approche séquentielle, un seul échantillon est d’abord analysé pour A, puis le matériel restant est analysé pour B, puis pour C, etc. Cette approche est particulièrement utile lorsque la quantité d’échantillon est limitée.

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5 échantillons distincts pour 5 tests

• Tube 1 : Test pour A
• Tube 2 : Test pour B
• Tube 3 : Test pour C
• Tube 4 : Test pour D
• Tube 5 : Test pour E

Approche séquentielle : 1 échantillon est utilisé pour 5 tests

1 Tube :

• Étape 1 : Test pour A
• Étape 2 : Test pour B
• Étape 3 : Test pour C
• Étape 4 : Test pour D
• Étape 5 : Test pour E

Les techniques séquentielles ont été utilisées avec succès dans l’analyse de multiples protéines réceptrices immunitaires et d’autres composants sanguins (23-26). En utilisant un petit volume de sang, Osuchowski et al. ont mesuré jusqu’à quinze molécules sécrétées différentes en cinq cycles consécutifs, sans interférence entre tests ni détérioration de l’échantillon (25).

L’utilisation de telles techniques pourrait accroître la quantité d’informations obtenues, tout en réduisant simultanément la quantité d’échantillon nécessaire. De telles méthodes rendent également beaucoup plus pratique l’inclusion d’échantillons en double et en triple dans une même expérience.

Tests sérologiques pour la glycophorine A humaine

Le test le plus important à réaliser sur les taches de sang du Suaire de Turin est d’établir sans équivoque leur origine humaine. En 2010, un anticorps monoclonal spécifique de la glycophorine A humaine devint disponible, permettant pour la première fois une identification rapide et spécifique du sang humain (27). La glycophorine A est une protéine membranaire exprimée à la surface des globules rouges chez l’homme et d’autres primates (28).

Les études diagnostiques et de spécification de cet anticorps démontrent une absence de réactivité croisée avec les primates non humains, y compris le bonobo (chimpanzé nain), le chimpanzé, le gorille, l’orang-outan et le babouin. La réactivité est également négative avec le sang d’animaux non apparentés tels que le chien, le chat, le cheval, le poulet et le porc.

Les données issues de ces expériences pourraient établir de manière concluante que le sang est d’origine humaine et confirmer, tout en les prolongeant, les précédentes études de caractérisation du sang qui étaient intrinsèquement limitées par la réactivité croisée. De plus, la démonstration définitive de la nature humaine des taches de sang par de tels tests permettrait de valider l’utilisation future d’autres réactifs « anti-humains » qui montrent une certaine réactivité croisée avec les composants sanguins de primates étroitement apparentés.

Tests sérologiques et ADN pour les antigènes ABO

Comme les données actuelles sur le typage sanguin du Suaire reposent principalement sur des méthodes de typage direct (15), dont une grande partie fut obtenue en utilisant des anticorps polyclonaux, il serait instructif d’effectuer des études de typage supplémentaires en utilisant des anticorps monoclonaux, en particulier à partir de plusieurs zones du tissu (22).

Il serait également précieux d’envisager de réaliser des études au niveau moléculaire, car l’analyse de l’ADN permettrait de contourner les objections éventuelles soulevées par les méthodes sérologiques (15), et d’élargir considérablement ces résultats. Les capacités de sensibilité de la technique de réaction en chaîne par polymérase (PCR) dans l’analyse moderne de l’ADN (fragmenté) sont telles qu’elles pourraient suffire à générer des résultats significatifs.

Tests sérologiques et ADN pour les antigènes HLA

Les antigènes leucocytaires humains (HLA) sont les principales protéines du complexe majeur d’histocompatibilité (CMH), essentielles au fonctionnement du système immunitaire chez l’homme (1). Dans le cadre d’une transplantation d’organe, lorsqu’une personne est « typée » afin de déterminer si elle est un receveur/donneur approprié pour un organe particulier, ce sont les antigènes HLA qui sont évalués.

Il existe deux ensembles de molécules HLA : les molécules de classe I (HLA-A, HLA-B et HLA-C) et les molécules de classe II (HLA-DP, HLA-DM, HLA-DOA, HLA-DOB, HLA-DQ et HLA-DR), qui sont exprimées sur de nombreuses cellules du corps, y compris les globules blancs (mais pas les globules rouges) (1,2).

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Les antigènes HLA sont les molécules les plus polymorphes qui existent chez l’homme, ce qui signifie que de multiples formes de ces gènes (allèles) sont présentes dans la population. Par exemple, plus de 2700 allèles différents ont été rapportés pour la molécule HLA-B (1,29). Les gènes HLA sont hérités selon un mode mendélien typique (une copie de la mère, une copie du père). L’étude de l’expression des antigènes HLA peut fournir des informations concernant l’origine ethnique et les liens de parenté entre individus et populations.

En effet, en raison de l’énorme diversité qui existe parmi les antigènes HLA, même un profil HLA partiel peut fournir des informations précieuses sur le degré de parenté entre deux individus (par ex. la relation entre les taches de sang du Suaire et celles d’une personne soupçonnée) ; de telles données sont beaucoup plus concluantes que de simplement partager un même groupe sanguin.

Aucune information n’existe actuellement sur l’expression de molécules HLA liées au Suaire. La faisabilité de telles études pourrait être envisagée en utilisant une approche similaire à celle des antigènes ABO, c’est-à-dire par des tests sérologiques et ADN.

Tests sérologiques et ADN pour d’autres antigènes des globules rouges

En plus des antigènes ABO, qui sont les plus couramment étudiés en raison de leur importance dans les transfusions sanguines, il existe plus de 30 autres groupes de molécules sanguines, y compris le système MNS mentionné précédemment. L’expression des antigènes MNS fut évaluée à l’aide de sérums polyclonaux (16) ; il pourrait être instructif d’étendre ces études en recourant à des anticorps monoclonaux plus modernes et d’envisager un examen au niveau des gènes.

L’expression du facteur Rh, généralement indiquée après la détermination du groupe sanguin d’un individu comme positif ou négatif, n’a pas été précédemment évaluée dans les taches de sang du Suaire, car il aurait été rapporté que le matériel était trop dégradé pour être étudié au niveau protéique (15). De nombreux anticorps monoclonaux anti-Rh sont maintenant disponibles et pourraient accroître la sensibilité de la détection dans de telles études ; l’évaluation des taches de sang à plusieurs endroits pourrait également être utile pour déterminer l’uniformité de ces résultats sur différentes zones du tissu. Le gène Rh est situé sur le chromosome 1 ; si une quantité suffisante d’ADN de cette région était intacte, cela pourrait offrir une approche alternative.

De manière similaire aux antigènes HLA, les antigènes du groupe sanguin Kell, codés par le gène KEL, sont également hautement polymorphes. Après les systèmes ABO et Rh, le système Kell est le troisième le plus puissant pour déclencher une réaction immunitaire lors de transfusions incompatibles (30). Comme pour les antigènes HLA, l’identification des formes d’antigènes Kell présentes pourrait fournir des informations importantes concernant l’origine ethnique, ainsi que la possible relation entre les taches de sang du Suaire et celles du Suaire d’Oviedo.

Tests sérologiques pour l’hémoglobine, la bilirubine et les protéines de la bande III

Des études chimiques et spectroscopiques ont établi que l’hémoglobine est présente dans les zones tachées de sang du Suaire. Bien que Garza-Valdes ait signalé une coloration positive de fibres tachées de sang avec des anticorps anti-hémoglobine, aucune donnée ni spécification n’a été publiée (voir 13 et note correspondante). De multiples anticorps monoclonaux existent désormais, spécifiques de l’hémoglobine, qui pourraient confirmer et étendre les résultats précédents.

Les conclusions de Heller et Adler concernant la présence de bilirubine dans les zones tachées de sang provenaient principalement d’analyses spectroscopiques (3,4,6).

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Des anticorps monoclonaux spécifiques de la bilirubine sont maintenant disponibles et pourraient contribuer à vérifier ces résultats sérologiquement. De plus, une analyse chimique plus complète de la présence de bilirubine pourrait être réalisée à l’aide de la chromatographie liquide haute performance (HPLC), qui ne nécessite qu’une très petite quantité d’échantillon (31).

La bilirubine pourrait présenter un intérêt particulier car il a été suggéré qu’elle est un facteur important pour la couleur rouge inhabituelle du sang sur le Suaire (6). Dans le sang frais, la bilirubine est quantifiée en normalisant par unité de volume sanguin. Les estimations de bilirubine dans des taches de sang anciennes seraient plus difficiles ; une analyse semi-quantitative pourrait être réalisée en normalisant le contenu en bilirubine par rapport à la quantité d’un autre composant sanguin, par exemple l’albumine.

La protéine de la bande III est une protéine structurale importante de la membrane des globules rouges, à laquelle plus de 80 % des molécules ABO sont attachées. Un globule rouge individuel exprime environ un million de molécules de la bande III, qui constituent environ 25 % de la surface cellulaire (32).

L’évaluation de l’expression de la bande III pourrait contribuer à fournir une preuve supplémentaire de l’existence de sang (humain) sur le Suaire. L’isolement des protéines de la bande III pourrait également offrir un moyen de purifier les antigènes ABO associés aux membranes des globules rouges (15). Une telle approche permettrait d’annuler efficacement les problèmes de « faux positifs » liés au typage ABO, supposément dus à une contamination par des bactéries et d’autres organismes (15).

Isolement et séquençage de l’ADN mitochondrial

Contrairement à l’ADN nucléaire, qui se présente sous la forme d’une à deux copies par cellule (une copie pour les cellules sexuelles : spermatozoïdes et ovules ; deux copies pour les autres types de cellules), la plupart des cellules humaines contiennent environ 1 000 à 10 000 copies d’ADN mitochondrial par cellule ; une cellule contient un seul noyau, mais possède de nombreuses mitochondries, nécessaires pour fournir de l’énergie à diverses fonctions cellulaires.

Le nombre élevé de copies d’ADN mitochondrial s’avère souvent utile dans des conditions de quantité limitée d’échantillon, telles que la dégradation de l’ADN. L’ADN mitochondrial est particulièrement précieux pour déterminer l’identité et les relations de parenté entre individus, car, contrairement aux gènes nucléaires dans lesquels une copie est héritée de chaque parent, l’ADN mitochondrial est reçu uniquement de la mère (33).

La probabilité que deux individus non apparentés possèdent le même ADN mitochondrial est extrêmement faible. Le faible taux de mutation de l’ADN mitochondrial est amplifié par rapport à l’ADN nucléaire, permettant une investigation plus approfondie de la lignée ancestrale.

Une analyse comparative de l’ADN mitochondrial isolé à partir des taches de sang du Suaire et de celles du Suaire d’Oviedo pourrait fournir les données les plus définitives concernant la relation entre ces deux artefacts.

Résumé

Le présent article évalue les preuves empiriques que le sang sur le Suaire de Turin est d’origine humaine. Bien que la majorité des données sérologiques soutiennent l’idée que le sang est (au moins) primate, une seule étude (brève) aborde directement la question de la nature humaine des taches de sang.

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Pour la plupart des études, l’homologie partagée entre les composants sanguins humains et primates limite la possibilité d’une conclusion indiscutable selon laquelle le sang est humain. Les études actuelles sur l’ADN ne sont pas particulièrement utiles en raison de la similitude extrême entre la région clonée et séquencée du gène de la bêta-globine chez l’homme et chez les primates apparentés ; de plus, la question de l’ADN endogène versus exogène demeure quelque peu non résolue.

Enfin, l’utilité de méthodes de test supplémentaires, dont beaucoup ont été développées depuis que les études originales furent réalisées il y a environ trente ans, est discutée pour l’analyse des taches de sang du Suaire.

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Remerciements

Merci à Barrie Schwortz et Tammy Walden pour leur relecture critique du manuscrit. Comme toujours, merci à ma femme, Kathy, pour tout.

Références

1. Deves, P. Roitt’s Essential Immunology, Wiley-Blackwell, Hoboken, NJ (2006).
2. Rodak, et al. Hematology: Clinical Principles and Applications, Saunders Elsevier, St. Louis, MO (2007).
3. Heller, J.H. et A. Adler, « A Chemical Investigation of the Shroud of Turin », Canadian Forensic Society Scientific Journal 14 : 81-103 (1981).
4. Heller, J.H. Report on the Shroud of Turin. Houghton-Mifflin Co., Boston, MA (1983).
5. Jumper, E.J. et al., « A comprehensive examination of the various stains and images on the Shroud of Turin », ACS Advances in Chemistry, Archaeological Chemistry III 205 : 447-476 (1984).
6. Adler, A. The Orphaned Manuscript, A gathering of Publications on the Shroud of Turin. Shroud Spectrum International Special Issue, 1st Edition, éd. D. Crispino, Effatà Editrice, Cantalupa (Turin), Italie (2002).
7. Kingsley, P.D. et al., « Yolk sac-derived primitive erythroblasts enucleate during mammalian embryogenesis », Blood 104 : 19-25 (2004).
8. Chromosome numbers in different species (1998)
   http://www.vivo.colostate.edu/hbooks/genetics/medgen/chromo/species.html
9. Black, C.M. et al. « Human markers for IgG2 and IgG4 appear to be on the same molecule in the chimpanzee », Immunology 72 : 94-98 (1991).
10. Baima Bollone, P.L., et al., « La Dimostrazione della presenza di trace di sangue umano sulla Sindone », Sindon 30 : 5-8 (1981).
11. Baima Bollone, P.L. et al., « Identification of the group of the traces of human blood on the Shroud », Shroud Spectrum International 6 : 3-6 (1983).
12. Baima Bollone, P.L., « The Forensic Characteristics of the Blood Marks » in The Turin Shroud: Past, Present, and Future, éd. S. Scannerini et P. Savarino [Int.

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13. Garza-Valdes, L., The DNA of God? Doubleday, New York, USA (1999).
    Note : au cours de la préparation de ce manuscrit et en tentant de contacter le Dr Garza-Valdes, il a été appris que celui-ci était décédé en novembre 2010. Aucune information supplémentaire concernant les détails de ces études (données de séquençage, données sérologiques) n’a été publiée.
14. Barnabas, J. et al., « Evolution of hemoglobin in primates and other therian mammals », Comparative Biochemistry and Physiology, Part B: Comparative Biochemistry 39 : 455-482 (1971).
15. Kearse, K.P., « Blood on the Shroud of Turin: An Immunological Review », http://www.shroud.com/pdfs/kearse.pdf, 2012.
16. Baima Bollone, P.L., et al., « Ricerca degli antigeni M, N ed S nelle trace di sangue sulla Sindone », Sindon 34 : 9-13 (1985).
17. Blumenfeld, O., « Non-human orthologs of the MNS blood group system », http://www.ncbi.nlm.nih.gov/projects/gv/mhc/xslcgi.cgi?cmd=bgmut/orthologs_mns (2011).
18. Rearden, A. et al., « Glycophorin B and glycophorin E genes arose from the glycophorin A ancestral gene via two duplications during primate evolution », J. Biol. Chem. 268 : 2260-2267 (1993).
19. Blumenfeld, O. et al., Molecular Biology and Evolution of Blood Group and MHC Antigens in Primates, Springer-Verlag, Berlin, Allemagne (1997).
20. Pennisi, E., « And the gene number is…? », Science 288 : 1146-1147 (2000).
21. Savatier, P. et al., « Nucleotide sequence of the Beta-globin genes in gorilla and macaque: The origin of nucleotide polymorphisms in human », M. Mol. Evol. 24 : 309-318 (1987).
22. Barberis, B., « Perspectives for the future study of the Shroud », http://www.shroud.com/pdfs/barberisv.pdf, 2012.
23. Kearse, K.P., et al., « TCR alpha-CD3 delta epsilon association is the initial step in alpha beta dimer formation in murine T cells and is limiting in immature CD4+ CD8+ thymocytes », Immunity 2 : 391-399 (1995).

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24. Van Leuven, J.E.M., and K.P. Kearse, « Deglycosylation of N-linked glycans is an important step in the dissociation of calreticulin-class I TAP complexes », Proc. Natl. Acad. Sci. 103 : 13997-14001 (1996).
25. Osuchowski, M.F., et al., « Sequential ELISA to profile multiple cytokines from small volumes », J. Immunol. Methods 302 : 172-181 (2005).
26. Osuchowski, M.F., and D.G. Remick, « The repetitive use of samples to measure multiple cytokines: the sequential ELISA », Methods 38 : 304-311 (2006).
27. Independent Forensics, http://www.ifi-test.com/pdf/BloodValid.pdf (2010).
28. National Institutes of Health online bookshelf, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK2274/, (2005).
29. Marsh, S.G.E. et al., « Nomenclature for factors of the HLA system », Tissue Antigens 75 : 291-455 (2010).
30. National Institutes of Health online bookshelf, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/books/NBK2270/, (2005).
31. Espinoza, E.O., et al., « Identification and quantitation of source from hemoglobin of blood and blood mixtures by high performance liquid chromatography », J. Forensic Sciences 41 : 804-811 (1996).
32. Kimura, A., et al., « ABO blood grouping of bloodstains by sandwich ELISA using monoclonal antibody specific for human red cell band 3 », Int. J. Leg. Med 105 : 209-212 (1993).
33. Yaffe, M.P., « The machinery of mitochondrial inheritance and behavior », Science 283 : 1493-1497 (1999).